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  • 159-2642-3062 027-65317797
    服務(wù)熱線(工作日:9:00-17:30)

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    • 產(chǎn)品名稱: Mycoplasma PCR Test Kit
    • 產(chǎn)品貨號(hào): CSK00002
    • 貨期: 現(xiàn)貨
    • 價(jià)格與訂購(gòu): 2800
    • 數(shù)量:
      庫(kù)存: 1000
    • 規(guī)格:
    • 產(chǎn)品信息
    • 如何訂購(gòu)

      概述(Summary)icon
      產(chǎn)品英文名(Product Name)
      Mycoplasma PCR Test Kit
      產(chǎn)品中文名
      支原體PCR檢測(cè)試劑盒
      產(chǎn)品描述(Description)
      支原體PCR檢測(cè)試劑盒是一款具有快速、靈敏、特異性高等特點(diǎn)的支原體檢測(cè)試劑盒,可用于細(xì)胞、培養(yǎng)基、動(dòng)物血清等的支原體檢測(cè)。本產(chǎn)品通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(PCR)特異擴(kuò)增支原體16s rRNA 基因保守區(qū)域片段,進(jìn)行支原體檢測(cè),能夠檢測(cè)包括M. arthritidis,M. hominis,M. hyorhinis,M. fermentans,M. orale,M. salivarium,M. bovis,M. bovigenitalium,M.pneumoniae,M. pirum等在內(nèi)的數(shù)十種常見(jiàn)支原體。
      儲(chǔ)存條件(Storage)
      儲(chǔ)存于-15 ~ -25℃。
      運(yùn)輸方式(Shipping)
      干冰運(yùn)輸。
      Note
      For research use only .
      使用方法(Standard Operating Procedure)icon
      1. 收取待檢樣品。貼壁細(xì)胞:待細(xì)胞生長(zhǎng)至80%左右即可,使用細(xì)胞刮刀刮取細(xì)胞(送檢細(xì)胞不能用消化液消化細(xì)胞);懸浮細(xì)胞:待細(xì)胞生長(zhǎng)至80%左右即可直接進(jìn)入下一步離心;

      2. 1000rpm離心5min,棄上清,留100-200μl培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,沸水浴10min;      

      3. 將煮沸的細(xì)胞懸浮液12000rpm離心3-5min;

      4. 所得樣品取4μl直接用于PCR檢測(cè),或凍存于-20℃?zhèn)溆茫?/p>

      注:一般以6孔板接種細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)至80-90%時(shí)即可取樣進(jìn)行檢測(cè)。培養(yǎng)液中的青霉素和鏈霉素不會(huì)影響檢測(cè)效果。

      5. PCR檢測(cè)

      5.1充分融化PCR反應(yīng)液,按照下表配制PCR反應(yīng)體系:

      組分

      陽(yáng)性對(duì)照組

      陰性對(duì)照組

      實(shí)驗(yàn)組

      PCR反應(yīng)液

      14μl

      14μl

      14μl

      引物

      2μl

      2μl

      2μl

      陽(yáng)性對(duì)照

      4μl

      -

      -

      待檢樣本

      -

      -

      4μl

      ddH2O

      -

      4μl

      -

      5.2 將PCR反應(yīng)管放入PCR儀,參照以下參數(shù)運(yùn)行PCR反應(yīng)程序:

      程序

      運(yùn)行參數(shù)

      循環(huán)數(shù)

      預(yù)變性

      94℃ 5min

      -

      循環(huán)

      變性

      94℃  30s

      30

      退火

      55℃  30s

      延伸

      72℃  15s

      延伸

      72℃ 5min

      -

       

      5.3瓊脂糖凝膠電泳。

      6. 凝膠成像觀察

      注:支原體陽(yáng)性細(xì)胞擴(kuò)增片段約270bp。

      M :marker

      +  :陽(yáng)性對(duì)照

      -  :陰性對(duì)照

      1-3:檢測(cè)為陽(yáng)性的細(xì)胞

      4-5:檢測(cè)為陰性的細(xì)胞

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