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 小 G 蛋白是從屬于細(xì)胞調(diào)節(jié)因子中的一個(gè)超家族。Rho 家族是小 G 蛋白中的一個(gè)亞家族，它在細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、細(xì)胞分裂以及基因轉(zhuǎn)錄中發(fā)揮主要作用。而本試劑盒中的 RhoA 就屬于Rho 亞家族中的一種， RhoA 參與生理活動(dòng)過程中其分子結(jié)構(gòu)會(huì)呈現(xiàn)出 2 種相互轉(zhuǎn)換的形式：與 GTP 結(jié)合的激活狀態(tài)和與 GDP 結(jié)合的非活性狀態(tài)。

    目前RhoA蛋白活性的檢測(cè)主要是依據(jù)小GTP酶RhoA可以與RhoA效應(yīng)蛋白(Rhotekin)的 RBD 區(qū)域結(jié)合，使 RhoA 效應(yīng)蛋白活化從而發(fā)揮生物學(xué)功能，進(jìn)而間接的進(jìn)行 RhoA 活性功能的監(jiān)測(cè)。然而此方法在檢測(cè)過程中存在著一定的局限性比如 GTP 水解成 GDP 的速度過快以及 RhoA-GTP 結(jié)合蛋白與 RBD 結(jié)合區(qū)域之間較低的親和力，導(dǎo)致這種檢測(cè)方法的重復(fù)性較差。

   RhoA 活性檢測(cè)試劑盒主要是依據(jù)單克隆抗體能夠特異性的識(shí)別特殊構(gòu)象的 RhoA-GTP 結(jié)合蛋白，而不識(shí)別 RhoA-GDP 結(jié)合蛋白，進(jìn)而簡單并且快速的進(jìn)行 RhoA 的活性檢測(cè)。同時(shí)試劑盒中的 RhoA-GTP 單克隆抗體也可以進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞和組織中 RhoA 的活性監(jiān)測(cè)。每套試劑盒可以進(jìn)行 20 次檢測(cè)。檢測(cè)原理

    RhoA 活性檢測(cè)試劑盒主要是利用識(shí)別蛋白特異構(gòu)象的 RhoA-GTP 單克隆抗體特異性的去檢測(cè)細(xì)胞提取物或者體外的（樣品需要進(jìn)行 GTPγS 活化處理）活性 RhoA-GTP 的水平。簡言之，特異性識(shí)別 RhoA 活化構(gòu)象的鼠單克隆抗體可以特異性結(jié)合細(xì)胞裂解液中的 RhoA-GTP 活性蛋白，然后利用 protein A/G 將抗原抗體的結(jié)合物吸附下來，再利用特異性識(shí)別 RhoA 活化構(gòu)象的兔多克隆抗體進(jìn)行免疫印跡分析進(jìn)行檢測(cè)。