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     小G蛋白是從屬于細(xì)胞調(diào)節(jié)因子中的一個超家族。Rho家族是小G蛋白中的一個亞家族，它在細(xì)胞運動、細(xì)胞分裂以及基因轉(zhuǎn)錄中發(fā)揮主要作用。而本試劑盒中的Cdc42就屬于Rho亞家族中的一種， Cdc42參與生理活動過程中其分子結(jié)構(gòu)會呈現(xiàn)出2種相互轉(zhuǎn)換的形式：與GTP結(jié)合的激活狀態(tài)和與GDP結(jié)合的非活性狀態(tài)。

       目前Cdc42蛋白活性的檢測主要是依據(jù)小GTP酶Cdc42可以與p21活化激酶（PAK）的p21結(jié)合區(qū)域（PBD）結(jié)合，使PAK活化從而發(fā)揮生物學(xué)功能，進(jìn)而間接的進(jìn)行Cdc42活性功能的監(jiān)測。然而此方法在檢測過程中存在著一定的局限性比如GTP水解成GDP的速度過快以及Cdc42-GTP結(jié)合蛋白與p21結(jié)合區(qū)域之間較低的親和力，導(dǎo)致這種檢測方法的重復(fù)性較差。

      武漢科斯坦生物技術(shù)有限公司推出的Cdc42活性檢測試劑盒主要是依據(jù)單克隆抗體能夠特異性的識別Cdc42-GTP結(jié)合蛋白，而不識別Cdc42-GDP結(jié)合蛋白，進(jìn)而簡單并且快速的進(jìn)行Cdc42的活性檢測。同時試劑盒中的Cdc42-GTP單克隆抗體也可以進(jìn)行免疫組化實驗中細(xì)胞和組織中Cdc42的活性監(jiān)測。每套試劑盒可以進(jìn)行20次檢測。

武漢科斯坦生物技術(shù)有限公司的Cdc42活性檢測試劑盒主要是利用識別蛋白特異形態(tài)的Cdc42-GTP單克隆抗體特異性的去檢測細(xì)胞提取物或者體外的（樣品需要進(jìn)行GTPγS活化處理）活性Cdc42-GTP的水平。簡言之，特異性識別Cdc42活化構(gòu)象的鼠單克隆抗體可以特異性結(jié)合細(xì)胞裂解液中的Cdc42-GTP活性蛋白，然后利用protein A/G將抗原抗體的結(jié)合物吸附下來，再利用特異性識別Cdc42活化構(gòu)象的兔多克隆抗體進(jìn)行免疫印跡分析進(jìn)行檢測。

1. 特異性識別Cdc42活性構(gòu)象的鼠單克隆抗體（Anti-active Cdc42, Mouse MonoclonalAntibody (Catalog No. 26905)）：小管裝--30ul (抗體濃度是1mg/ml)，抗體溶于PBS（pH7.4）并包含50%的甘油和0.05%的疊氮化鈉。此抗體可以特異性識別所有脊椎動物中的Cdc42-GTP。

2. Protein A/G agarose (Catalog No. 30301) ：小管裝—400ul包含200ul Protein A/G agarose     和200ul 20%乙醇溶液。（使用時溶液需要充分混勻，再吸取）

3. 5X Assay/Lysis Buffer (Catalog No. 30303)：小瓶裝—30mL包含250 mM Tris-HCl (pH 8.0),     750 mM NaCl, 50 mM MgCl2, 5 mM EDTA, 5% Triton X-100。

4. 特異性識別Cdc42活性構(gòu)象的兔多克隆抗體（Anti-Cdc42, Rabbit Polyclonal Antibody  (Catalog No.21010)）：小管裝--30ul (抗體濃度是1mg/ml)，抗體溶于PBS（pH 7.4）并包含有   50%的甘油

5. 100 X GTPγS (Catalog No. 30302) ：小管裝—100ul (10 mM) ，實驗中0.5mL細(xì)胞裂解液使用      5ul GTPγS標(biāo)記。

6. 100 X GDP (Catalog No. 30304) ：小管裝—100ul (100 mM) ，實驗中0.5mL細(xì)胞裂解液使用5ul GDP標(biāo)記。